实验室自己可以配制PCR Mix吗?


答:灵敏度指的是PCR扩增反应能够检测到目的基因的最小值。研究结果表明,影响PCR扩增效率的因素,如模板的复杂程度与完整性、引物的纯度及其与模板的结合效率、反应温度、 DNA聚合酶的热稳定性与扩增性能、反应缓冲液的离子组成(主要指阳离子)、反应优化剂等等,都决定了PCR实验的检测灵敏度。在最佳的扩增条件下,常规PCR反应能够检测到的pg(10-12g)数量级的目的基因。对于一个特定的目的基因而言,模板与引物通常都是已经限定好的因素。因此,选择什么样的PCR反应体系(包括DNA聚合酶与反应缓冲液等)就是研究者提高PCR实验灵敏度的关键因素了。

与实验室自配的PCR扩增体系相比,东盛的Taq Mix对反应缓冲液中的成分进行优化,并加入了适当比例的反应增强剂(PCR Enhancer),提高了DNA聚合酶的热稳定性,显著降低模板的二级结构对PCR扩增性能的影响,使得DNA聚合酶处于最适活性状态,从而获得了比自配体系更高的检测灵敏度。即时反应体系中只有几个目的基因的拷贝,也能轻松检测。


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